domingo, 18 de enero de 2015
EJEMPLO DE TRANSGÉNICO EN DIABETES TIPO II
Los modelos animales utilizados en las investigaciones sobre la diabetes mellitus tipo 2 (DM2), ayudan al estudio de los mecanismos patogénicos que conducen a la presentación de esta enfermedad, acompañada de severa o moderada hiperglucemia, intolerancia a la glucosa y otras alteraciones metabólicas relacionadas con la misma, y dan la oportunidad de explorar nuevos tratamientos y formas de prevenir estos cuadros morbosos.
Los ratones transgénicos transportan múltiples copias del gen de la insulina del hombre y muestran hiperinsulinemia basal crónica, una respuesta alterada a la insulina y a la glucosa, insulinorresistencia e intolerancia a la glucosa.26 Por ejemplo, la secreción de insulina se interrumpe en ratones machos que expresan oncoproteína humana H-ras y se manifiesta una diabetes con elevadas concentraciones de calmodulina en las células ß.27
INFORME DE TRANSGENICO
TIPO
DE ANIMAL:
Ratones transgénicos
PASOS:
1. Células Madre Aislar
Aislar las células madre embrionarias que se originaron a partir
de ratones marrones masculinos con un gen OhNo normal (azul).
2. Añadir gen inactivo con marcador
Para estas células, añadir una copia que contenga una mutado,
inactivo gen OhNo (rojo), y un gen marcador de resistencia a fármaco (rosa).
3. Genes similares Naturalmente
Intercambia
Por mecanismos que no se entienden completamente, sin embargo,
los genes similares intercambiarán lugares. El
gen de resistencia a los medicamentos más gen marcador OhNo se incorpora en el
genoma, y la versión normal es expulsado. Este
proceso se denomina recombinación homóloga.
4. Agregue Drogas
Las células que no han incorporado el gen OhNo inactiva no
tienen el gen marcador de resistencia a los medicamentos (rosa).
Adición de la droga mata las células sin el marcador, dejándolo
con sólo las células que tienen una versión inactiva del gen OhNo.
5. Crecer ratones quiméricos
Mediante el trasplante de células madre que llevan el gen Ohno
inactivo en un embyro ratón blanco, vamos a crear lo que se llama una quimera. Las quimeras tienen parches de células
de todo el cuerpo que crecieron a partir de células de ratón y parches blancos
que crecieron a partir de células madre marrones. Algunas de las células que tienen el
gen OhNo inactivos pueden convertirse en células reproductoras.
Las quimeras son fáciles de identificar ya que tienen ambos
parches marrones y blancas de la piel.
6. compañero masculino Chimera
Si una quimera macho tiene algunas células reproductivas (semen)
que se originaron a partir de las células madre de color marrón, que va a
producir algunos descendientes marrones cuando se aparearon con una hembra
blanca.
7. Prueba y casta Offspring
La mitad de la descendencia marrón tendrá una copia del gen OhNo
inactivo en todas sus células, incluyendo sus células reproductoras. Estos ratones tienen una copia normal
del gen OhNo de su madre (no mostrado) y una copia inactiva de su padre. Así que la mitad de sus células
reproductivas contendrá una copia normal y medio contendrá una copia inactiva.
Estos ratones pueden ser identificados mediante la realización
de secuenciación de ADN en sus genes Ohno y luego criados entre sí.
Una cuarta parte de
su offsping resultante tendrá dos copias de la "fuera golpeado" o
inactivo gen OhNo.
USO:
Ahora puede estudiar
estos ratones para determinar la forma en que carece del gen OhNo puede afectar
a los ataques de pánico.
jueves, 8 de enero de 2015
Adn recombinante en la diabetes tipo II
Las hormonas como la insulina son
creadas en cuerpos que funcionan normalmente. Esta hormona es una proteína que
esta hecha de una secuencia específica de aminoácidos. La secuencia de
aminoácidos está determinada por el ADN de una persona.
Anteriormente, los diabéticos usaban
insulina porcina y vacuna, pero no era bien tolerada por todos los pacientes ya
que su secuencia de aminoácidos es levemente diferente. Ahora insulina humana
puede ser producida en masa a través de procesos de ingeniería genética.
La tecnología recombinante del ácido
desoxiribonucleico (ADN) ha permitido el desarrollo de la insulina humana; sin
embargo, esta no ha resuelto totalmente los problemas relacionados con la
inmunogenicidad, entre otros problemas. Por tanto, las nuevas tecnologías son
aplicadas para crear los análogos de insulina.
Adn recombinante en la naturaleza
La modificación del ADN sin la intervención de la mano del hombre desde tiempos remotos ha permitido la diversidad de las especies en el planeta, con el uso coordinado de enzimas de restricción y de los vectores moleculares, es posible aislar una secuencia de ADN de cualquier organismo e insertarla en el ADN del otro. Los transgénicos son formas vivas con ADN extraño y que han sufrido tal transformación.
Por ejemplo en la reproducción sexual el ADN de los progenitores se combina de forma natural manifestándose como una mezcla de características en los descendientes.
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Técnicas Moleculares
En
principio se denomina así a todas las técnicas de laboratorio que se usan para
aislar ADN o extraerlo en alta pureza, visualizarlo para ver su estado,
cortarlo y pegarlo, amplificar una región en una enorme cantidad de moléculas
(clonación de fragmentos en bacterias u otros vectores como virus y PCR),
corte de una determinada región con enzimas de restricción para ver si por una
mutación se gana o se pierde un sitio de restricción (análisis de mutaciones
por RFLP o Restriction fragment lengt polymorphism), que significa:
diferencias en los tamaños de los fragmentos de restricción debido a
polimorfismos en el ADN entre otras.
Todas
estas técnicas tiene diversas aplicaciones generalmente en el diagnóstico de
enfermedades hereditarias, búsqueda de alelos mas o menos frecuentes asociados
a una característica que nos interesa seleccionar, diagnóstico de contaminación
bacteriana en alimentos diagnóstico viral o de infección viral (HIV,
Hepatitis C, PIF, otros), selección de marcadores moleculares para asistir en el
mejoramiento genético de una especie, test de paternidad, diganóstico de
identidad forense, etc.
La
primera técnica que todas las demás necesitan es la extracción del ADN, y para
ello es necesario purificarlo desde cualquier tejido aunque usualmente se hace
a partir de sangre. Se basa en una serie de lavados de la muestra y agregado de
proteinasas que eliminan las proteínas del medio, detergentes para elIminar las
membranas plasmáticas y luego ir purificando el ADN de esa mezcla de ARN
proteínas y restos celulares.
Análisis de PCR
Tema: Estandarización de la PCR para el diagnóstico del virus de la hepatitis B en Perú.
Objetivo: Diagnosticar pacientes infectados con hepatitis Buenas
Muestra: suero
ADN: ADN viral
Gen: Gen del antígeno de superficie HBs Ag y HBe Ag
PCR: PCR estándar
viernes, 12 de diciembre de 2014
PCR PARA DIABETES MELLITUS
La diabetes es una enfermedad crónica que se ven afectados muchos genes, esta matriz se puede utilizar para estudiar los modelos de la obesidad y la diabetes, para la detección de la terapéutica y sus objetivos, y al perfil del efecto de diversos factores epidemiológicos y ambientales en la expresión de genes en diferentes tejidos o líneas celulares. El uso de PCR en tiempo real, se puede analizar con facilidad y de forma fiable la expresión de un panel enfocado de genes relacionados con la diabetes con este arreglo.
viernes, 21 de noviembre de 2014
EPIGENETICA EN DIABETES
Las células beta pancreáticas sintetizan y secretan insulina. La regulación de la expresión del gen de insulina (INS) no se comprende del todo, pero existe evidencia de involucramiento epigenético tanto de estudios sobre la estructura de la cromatina como en el nivel de metilación del DNA. En una línea de células beta de ratón, el promotor proximal Ins es hiperacetilado en los residuos lisina de la histona 3 (H3) e hipermetilado en la lisina 4 de H3 (H3K4), marcas asociadas con una estructura de eucromatina abierta y genes transcritos activamente. Estas marcas no son detectadas en las líneas celulares no beta.
domingo, 16 de noviembre de 2014
Alteraciones en la Traducción en la diabetes
La traducción como mecanismo genético explica el paso de la información genética ADN que debe ser trascripta en ARNm y luego a proteínas. Existen otras formas de ARN, como el ARN ribosómico (ARNr) o el ARN de transferencia (ARNt), que catalizan reacciones biológicas, controlan la expresión de genes o interaccionan con cascadas de señalización dentro de las células. En los últimos años se ha descrito una nueva forma de RNA, el ARNlnc. Se trata de una molécula que no se traduce a proteína y se puede encontrar en diferentes partes de la célula.Los ARNlnc son cadenas largas de ARN codificadas en el genoma. Se trata pues de genes fuera de los genes clásicos, ya que éstos tradicionalmente se relacionan con la producción de proteínas. Su función todavía se desconoce, aunque se ha visto que los ARNlnc pueden llegar a ser muy específicos de diferentes tipos de tejidos y se han relacionado en algunos casos con cáncer, ciclo celular, el ensamblado de los ARNs o la regulación transcripcional.
Los genes HNF1A (OMIM 142410)9 , HNF1B (OMIM 189907)10 y HNF4A (OMIM 600281)11, que codifican las proteínas HNF1_, HNF-1` y HNF-4_ , son miembros de una familia de genes que codifican proteínas que actúan como factores de transcripción y se expresan en otros órganos además del páncreas y el hígado.
La diabetes producida por mutaciones en los genes que codifican las proteínas IPF1` (MODY 4) y NeuroD1 también denominado BETA2 (MODY 6), proteínas que actúan sobre la región más activa del promotor de la insulina32, causan un fenotipo similar a MODY 1, 3 y 5; no obstante, algunas mutaciones en estos genes se asocian a fenotipos específicos caracterizados por una edad de comienzo más tardía, entre la cuarta y sexta décadas de la vida, la presencia en algunos pacientes de obesidad y unos valores de insulina circulantes que no difieren de los de la población sana.
jueves, 6 de noviembre de 2014
Alteraciones en la Transcripción en la Diabetes Tipo 1
Una de las funciones de HNF-1β es la regulación
de la expresión génica en tejidos como el riñón. En este órgano, el promotor
proximal del gen Pkhd1 tiene un sitio de unión para HNF-1β, por lo que las mutaciones en este factor de
transcripción inhiben la expresión de HNF-1β y conducen a la formación de
quistes. Esto es lógico, puesto que las mutaciones del gen Pkhd1 son
responsables de la forma autosómica recesiva de la enfermedad renal poliquística.
Tomado de:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1137-66272011000300024
viernes, 31 de octubre de 2014
Alteraciones en la replicación del ADN en la diabetes tipo
La diabetes mellitus tipo 1 ( DM1 ) es una enfermedad compleja,
resultado de la interacción de factores genéticos, epigenéticos y factores
ambientales . Tras el éxito inicial de vinculación basado en la
familia analiza , que dejó al descubierto la fuerte vinculación y de asociación
entre las variantes de genes HLA y T1D , estudios de asociación del genoma
realizados con plataformas de genotipado el polimorfismo de un solo nucleótido
de alta densidad proporcionaron pruebas para una serie de nuevos loci , aunque
mapeo fino y caracterización de estas nuevas regiones que queda por realizar. Este hecho, junto con la evidencia de varias
modificaciones epigenéticas de la expresión génica , es una prueba convincente
de la compleja interacción entre factores genéticos y ambientales . En T1D ,
fenómenos epigenéticos , como la metilación del ADN , modificaciones de las
histonas , y microRNA desregulación , se han asociado con una expresión génica
alterada . El aumento de la evidencia epidemiológica y experimental apoya el
papel de las alteraciones genéticas y epigenéticas en la etiopatogenia de la
diabetes .sábado, 25 de octubre de 2014
Prueba para identificar Diabetes
Pruebas para confirmar Diabetes (CLIC)
El médico realizará una seríe de pruebas para
confirmar el diagnostico de diabetes. Estas pruebas son:
Resultados positivos deben ser confirmados por
el médico repitiendo la prueba de glucosa en ayunas o la prueba de Tolerancia a
la glucosa en un diferente día.
El médico realizará una seríe de pruebas para
confirmar el diagnostico de diabetes. Estas pruebas son:
Glucosa sanguínea en ayuno. Después de un ayuno
de aproximadamente 8 horas. Este examen es utilizado para diagnosticar diabetes
o pre-diabetes.
Tolerancia oral a la glucosa. Esta prueba
mide el nivel de glucosa en sangre después de un ayuno de 8 horas y después de
2 horas de haber tomado una bebida glucosaza. Esta prueba puede ser utilizada
para diagnosticar diabetes o pre-diabetes.
Glucosa sanguínea a cualquier hora del día. El
médico realiza pruebas de glucosa en sangre sin importar a que hora se tomó el
ultimo alimento. Esta prueba junto con una serie de síntomas es utilizada para
el diagnóstico de diabetes, pero no de pre-diabetes.
Resultados positivos deben ser confirmados por
el médico repitiendo la prueba de glucosa en ayunas o la prueba de Tolerancia a
la glucosa en un diferente día.
Prueba de screening y una prueba confirmatoria de la diabetes
Screening retinopatía
Se debe realizar exámenes
repetitivos anuales en todos los diabéticos. Mas tardíos si no hay evidencia de
retinopatía de forma repetitiva (cada 2-3 años) y mas frecuentes si la retinopatía
esta progresando. Los adultos diabéticos
tipo 1 deben realizarse un examen ocular completo por parte de un oftalmólogo u
optometrista tras cinco años del debut de la diabetes. La funduscopia puede
detectar la mayoría de retinopatías diabéticas significativas. La interpretación
de las imágenes la debe hacer un profesional con experiencia. No sustituye a un
examen ocular completo o en caso que el oftalmólogo lo recomiende. En mujeres
embarazadas o que quieren estarlo se debe explicar el procedimiento y los
riesgos que una retinopatía puede generar, el examen se debe realizar en el
primer trimestre y debe tener un riguroso seguimiento en el embarazo y un año después.
lunes, 13 de octubre de 2014
domingo, 12 de octubre de 2014
DIABETES MELLITUS TIPO 1
DIABETES MELLITUS TIPO 1
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La
diabetes tipo 1, se caracteriza por la destrucción de los islotes pancreáticos
de células beta e insulinopenia total; por lo que los individuos presentan la
tendencia hacia la cetosis en condiciones basales. Es una de las enfermedades
crónicas más frecuentes de la infancia, cuya incidencia está aumentando,
especialmente en niños menores de 5 años; afecta de manera importante la salud
de la población, sobre todo a través de sus complicaciones crónicas o a largo
plazo, que provocan una morbilidad frecuente y disminuyen de forma significativa
las expectativas de vida.
miércoles, 8 de octubre de 2014
¡Bienvenidos a mi Blog!
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| Hermoso cielo de Quito-Ecuador |
Cada amanecer doy gracias al cielo por estar con vida.
¡Solo venciéndote vencerás!
Dedico este blog a mi familia, gracias a su apoyo y confianza puedo prepararme para en un futuro convertirme en una profesional de la salud y estar al servicio de la comunidad.
Mariana, Cristina y a mis Hugos
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