TIPO
DE ANIMAL:
Ratones transgénicos
PASOS:
1. Células Madre Aislar
Aislar las células madre embrionarias que se originaron a partir
de ratones marrones masculinos con un gen OhNo normal (azul).
2. Añadir gen inactivo con marcador
Para estas células, añadir una copia que contenga una mutado,
inactivo gen OhNo (rojo), y un gen marcador de resistencia a fármaco (rosa).
3. Genes similares Naturalmente
Intercambia
Por mecanismos que no se entienden completamente, sin embargo,
los genes similares intercambiarán lugares. El
gen de resistencia a los medicamentos más gen marcador OhNo se incorpora en el
genoma, y la versión normal es expulsado. Este
proceso se denomina recombinación homóloga.
4. Agregue Drogas
Las células que no han incorporado el gen OhNo inactiva no
tienen el gen marcador de resistencia a los medicamentos (rosa).
Adición de la droga mata las células sin el marcador, dejándolo
con sólo las células que tienen una versión inactiva del gen OhNo.
5. Crecer ratones quiméricos
Mediante el trasplante de células madre que llevan el gen Ohno
inactivo en un embyro ratón blanco, vamos a crear lo que se llama una quimera. Las quimeras tienen parches de células
de todo el cuerpo que crecieron a partir de células de ratón y parches blancos
que crecieron a partir de células madre marrones. Algunas de las células que tienen el
gen OhNo inactivos pueden convertirse en células reproductoras.
Las quimeras son fáciles de identificar ya que tienen ambos
parches marrones y blancas de la piel.
6. compañero masculino Chimera
Si una quimera macho tiene algunas células reproductivas (semen)
que se originaron a partir de las células madre de color marrón, que va a
producir algunos descendientes marrones cuando se aparearon con una hembra
blanca.
7. Prueba y casta Offspring
La mitad de la descendencia marrón tendrá una copia del gen OhNo
inactivo en todas sus células, incluyendo sus células reproductoras. Estos ratones tienen una copia normal
del gen OhNo de su madre (no mostrado) y una copia inactiva de su padre. Así que la mitad de sus células
reproductivas contendrá una copia normal y medio contendrá una copia inactiva.
Estos ratones pueden ser identificados mediante la realización
de secuenciación de ADN en sus genes Ohno y luego criados entre sí.
Una cuarta parte de
su offsping resultante tendrá dos copias de la "fuera golpeado" o
inactivo gen OhNo.
USO:
Ahora puede estudiar
estos ratones para determinar la forma en que carece del gen OhNo puede afectar
a los ataques de pánico.
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