jueves, 8 de enero de 2015

Adn recombinante en la diabetes tipo II

Las hormonas como la insulina son creadas en cuerpos que funcionan normalmente. Esta hormona es una proteína que esta hecha de una secuencia específica de aminoácidos. La secuencia de aminoácidos está determinada por el ADN de una persona.
Anteriormente, los diabéticos usaban insulina porcina y vacuna, pero no era bien tolerada por todos los pacientes ya que su secuencia de aminoácidos es levemente diferente. Ahora insulina humana puede ser producida en masa a través de procesos de ingeniería genética. 
La tecnología recombinante del ácido desoxiribonucleico (ADN) ha permitido el desarrollo de la insulina humana; sin embargo, esta no ha resuelto totalmente los problemas relacionados con la inmunogenicidad, entre otros problemas. Por tanto, las nuevas tecnologías son aplicadas para crear los análogos de insulina.




Adn recombinante en la naturaleza

La modificación del ADN sin la intervención de la mano del hombre desde tiempos remotos ha permitido la diversidad de las especies en el planeta, con el uso coordinado de enzimas de restricción y de los vectores moleculares, es posible aislar una secuencia de ADN de cualquier organismo e insertarla en el ADN del otro. Los transgénicos son formas vivas con ADN extraño y  que han sufrido tal transformación.
Por ejemplo en la reproducción sexual el ADN de los progenitores se combina de forma natural manifestándose como una mezcla de características en los descendientes.



Técnicas Moleculares

En principio se denomina así a todas las técnicas de laboratorio que se usan para aislar ADN o extraerlo en alta pureza, visualizarlo para ver su estado, cortarlo y pegarlo, amplificar una región en una enorme cantidad de moléculas (clonación de fragmentos en bacterias u otros vectores como virus y PCR), corte de una determinada región con enzimas de restricción para ver si por una mutación se gana o se pierde un sitio de restricción (análisis de mutaciones por RFLP o Restriction fragment lengt polymorphism), que significa: diferencias en los tamaños de los fragmentos de restricción debido a polimorfismos en el ADN entre otras.
Todas estas técnicas tiene diversas aplicaciones generalmente en el diagnóstico de enfermedades hereditarias, búsqueda de alelos mas o menos frecuentes asociados a una característica que nos interesa seleccionar, diagnóstico de contaminación bacteriana en alimentos diagnóstico viral o de infección viral (HIV, Hepatitis C, PIF, otros), selección de marcadores moleculares para asistir en el mejoramiento genético de una especie, test de paternidad, diganóstico de identidad forense, etc.
La primera técnica que todas las demás necesitan es la extracción del ADN, y para ello es necesario purificarlo desde cualquier tejido aunque usualmente se hace a partir de sangre. Se basa en una serie de lavados de la muestra y agregado de proteinasas que eliminan las proteínas del medio, detergentes para elIminar las membranas plasmáticas y luego ir purificando el ADN de esa mezcla de ARN proteínas y restos celulares.



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Análisis de PCR

Tema: Estandarización de la PCR para el diagnóstico del virus de la hepatitis B en Perú. 

Objetivo: Diagnosticar pacientes infectados con hepatitis Buenas
Muestra: suero 
ADN: ADN viral
Gen: Gen del antígeno de superficie HBs Ag y HBe Ag
PCR: PCR estándar 

viernes, 12 de diciembre de 2014

PCR PARA DIABETES MELLITUS

La diabetes es una enfermedad crónica que se ven afectados muchos genes, esta matriz se puede utilizar para estudiar los modelos de la obesidad y la diabetes, para la detección de la terapéutica y sus objetivos, y al perfil del efecto de diversos factores epidemiológicos y ambientales en la expresión de genes en diferentes tejidos o líneas celulares. El uso de PCR en tiempo real, se puede analizar con facilidad y de forma fiable la expresión de un panel enfocado de genes relacionados con la diabetes con este arreglo.


viernes, 21 de noviembre de 2014

EPIGENETICA EN DIABETES

Las células beta pancreáticas sintetizan y secretan insulina. La regulación de la expresión del gen de insulina (INS) no se comprende del todo, pero existe evidencia de involucramiento epigenético tanto de estudios sobre la estructura de la cromatina como en el nivel de metilación del DNA. En una línea de células beta de ratón, el promotor proximal Ins es hiperacetilado en los residuos lisina de la histona 3 (H3) e hipermetilado en la lisina 4 de H3 (H3K4), marcas asociadas con una estructura de eucromatina abierta y genes transcritos activamente. Estas marcas no son detectadas en las líneas celulares no beta.





domingo, 16 de noviembre de 2014

Alteraciones en la Traducción en la diabetes




La traducción como mecanismo genético explica el paso de la información genética ADN que debe ser trascripta en ARNm y luego a proteínas. Existen otras formas de ARN, como el ARN ribosómico (ARNr) o el ARN de transferencia (ARNt), que catalizan reacciones biológicas, controlan la expresión de genes o interaccionan con cascadas de señalización dentro de las células. En los últimos años se ha descrito una nueva forma de RNA, el ARNlnc. Se trata de una molécula que no se traduce a proteína y se puede encontrar en diferentes partes de la célula.Los ARNlnc son cadenas largas de ARN codificadas en el genoma. Se trata pues de genes fuera de los genes clásicos, ya que éstos tradicionalmente se relacionan con la producción de proteínas. Su función todavía se desconoce, aunque se ha visto que los ARNlnc pueden llegar a ser muy específicos de diferentes tipos de tejidos y se han relacionado en algunos casos con cáncer, ciclo celular, el ensamblado de los ARNs o la regulación transcripcional.

Los genes HNF1A (OMIM 142410)9 , HNF1B (OMIM 189907)10 y HNF4A (OMIM 600281)11, que codifican las proteínas HNF1_, HNF-1` y HNF-4_ , son miembros de una familia de genes que codifican proteínas que actúan como factores de transcripción y se expresan en otros órganos además del páncreas y el hígado.
La diabetes producida por mutaciones en los genes que codifican las proteínas IPF1` (MODY 4) y NeuroD1 también denominado BETA2 (MODY 6), proteínas que actúan sobre la región más activa del promotor de la insulina32, causan un fenotipo similar a MODY 1, 3 y 5; no obstante, algunas mutaciones en estos genes se asocian a fenotipos específicos caracterizados por una edad de comienzo más tardía, entre la cuarta y sexta décadas de la vida, la presencia en algunos pacientes de obesidad y unos valores de insulina circulantes que no difieren de los de la población sana.