Biología Molecular: 2015

domingo, 18 de enero de 2015

EJEMPLO DE TERAPIA CON STEM CELLS EN DIABETES TIPO II

EJEMPLO DE TRANSGÉNICO EN DIABETES TIPO II

Los modelos animales utilizados en las investigaciones sobre la diabetes mellitus tipo 2 (DM2), ayudan al estudio de los mecanismos patogénicos que conducen a la presentación de esta enfermedad, acompañada de severa o moderada hiperglucemia, intolerancia a la glucosa y otras alteraciones metabólicas relacionadas con la misma, y dan la oportunidad de explorar nuevos tratamientos y formas de prevenir estos cuadros morbosos.

Los ratones transgénicos transportan múltiples copias del gen de la insulina del hombre y muestran hiperinsulinemia basal crónica, una respuesta alterada a la insulina y a la glucosa, insulinorresistencia e intolerancia a la glucosa.26 Por ejemplo, la secreción de insulina se interrumpe en ratones machos que expresan oncoproteína humana H-ras y se manifiesta una diabetes con elevadas concentraciones de calmodulina en las células ß.27

INFORME DE TRANSGENICO

TIPO DE ANIMAL:

Ratones transgénicos

PASOS:

1. Células Madre Aislar

Aislar las células madre embrionarias que se originaron a partir de ratones marrones masculinos con un gen OhNo normal (azul).

2. Añadir gen inactivo con marcador

Para estas células, añadir una copia que contenga una mutado, inactivo gen OhNo (rojo), y un gen marcador de resistencia a fármaco (rosa).

3. Genes similares Naturalmente Intercambia

Por mecanismos que no se entienden completamente, sin embargo, los genes similares intercambiarán lugares. El gen de resistencia a los medicamentos más gen marcador OhNo se incorpora en el genoma, y la versión normal es expulsado. Este proceso se denomina recombinación homóloga.

4. Agregue Drogas

Las células que no han incorporado el gen OhNo inactiva no tienen el gen marcador de resistencia a los medicamentos (rosa).

Adición de la droga mata las células sin el marcador, dejándolo con sólo las células que tienen una versión inactiva del gen OhNo.

5. Crecer ratones quiméricos

Mediante el trasplante de células madre que llevan el gen Ohno inactivo en un embyro ratón blanco, vamos a crear lo que se llama una quimera. Las quimeras tienen parches de células de todo el cuerpo que crecieron a partir de células de ratón y parches blancos que crecieron a partir de células madre marrones. Algunas de las células que tienen el gen OhNo inactivos pueden convertirse en células reproductoras.

Las quimeras son fáciles de identificar ya que tienen ambos parches marrones y blancas de la piel.

6. compañero masculino Chimera

Si una quimera macho tiene algunas células reproductivas (semen) que se originaron a partir de las células madre de color marrón, que va a producir algunos descendientes marrones cuando se aparearon con una hembra blanca.

7. Prueba y casta Offspring

La mitad de la descendencia marrón tendrá una copia del gen OhNo inactivo en todas sus células, incluyendo sus células reproductoras. Estos ratones tienen una copia normal del gen OhNo de su madre (no mostrado) y una copia inactiva de su padre. Así que la mitad de sus células reproductivas contendrá una copia normal y medio contendrá una copia inactiva.

Estos ratones pueden ser identificados mediante la realización de secuenciación de ADN en sus genes Ohno y luego criados entre sí.

Una cuarta parte de su offsping resultante tendrá dos copias de la "fuera golpeado" o inactivo gen OhNo.

USO:

Ahora puede estudiar estos ratones para determinar la forma en que carece del gen OhNo puede afectar a los ataques de pánico.

TOMADO DE...

jueves, 8 de enero de 2015

Adn recombinante en la diabetes tipo II

Las hormonas como la insulina son creadas en cuerpos que funcionan normalmente. Esta hormona es una proteína que esta hecha de una secuencia específica de aminoácidos. La secuencia de aminoácidos está determinada por el ADN de una persona.

Anteriormente, los diabéticos usaban insulina porcina y vacuna, pero no era bien tolerada por todos los pacientes ya que su secuencia de aminoácidos es levemente diferente. Ahora insulina humana puede ser producida en masa a través de procesos de ingeniería genética.

La tecnología recombinante del ácido desoxiribonucleico (ADN) ha permitido el desarrollo de la insulina humana; sin embargo, esta no ha resuelto totalmente los problemas relacionados con la inmunogenicidad, entre otros problemas. Por tanto, las nuevas tecnologías son aplicadas para crear los análogos de insulina.

Adn recombinante en la naturaleza

La modificación del ADN sin la intervención de la mano del hombre desde tiempos remotos ha permitido la diversidad de las especies en el planeta, con el uso coordinado de enzimas de restricción y de los vectores moleculares, es posible aislar una secuencia de ADN de cualquier organismo e insertarla en el ADN del otro. Los transgénicos son formas vivas con ADN extraño y que han sufrido tal transformación.

Por ejemplo en la reproducción sexual el ADN de los progenitores se combina de forma natural manifestándose como una mezcla de características en los descendientes.

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Técnicas Moleculares

En principio se denomina así a todas las técnicas de laboratorio que se usan para aislar ADN o extraerlo en alta pureza, visualizarlo para ver su estado, cortarlo y pegarlo, amplificar una región en una enorme cantidad de moléculas (clonación de fragmentos en bacterias u otros vectores como virus y PCR), corte de una determinada región con enzimas de restricción para ver si por una mutación se gana o se pierde un sitio de restricción (análisis de mutaciones por RFLP o Restriction fragment lengt polymorphism), que significa: diferencias en los tamaños de los fragmentos de restricción debido a polimorfismos en el ADN entre otras.

Todas estas técnicas tiene diversas aplicaciones generalmente en el diagnóstico de enfermedades hereditarias, búsqueda de alelos mas o menos frecuentes asociados a una característica que nos interesa seleccionar, diagnóstico de contaminación bacteriana en alimentos diagnóstico viral o de infección viral (HIV, Hepatitis C, PIF, otros), selección de marcadores moleculares para asistir en el mejoramiento genético de una especie, test de paternidad, diganóstico de identidad forense, etc.

La primera técnica que todas las demás necesitan es la extracción del ADN, y para ello es necesario purificarlo desde cualquier tejido aunque usualmente se hace a partir de sangre. Se basa en una serie de lavados de la muestra y agregado de proteinasas que eliminan las proteínas del medio, detergentes para elIminar las membranas plasmáticas y luego ir purificando el ADN de esa mezcla de ARN proteínas y restos celulares.